酶聯(lián)免疫分析儀是一種在臨床檢驗和生物醫(yī)學(xué)研究中廣泛使用的分析儀器，主要用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。其基本工作原理如下：
1.抗原 -抗體反應(yīng)原理
-在ELISA試驗中，首先將已知的抗原或抗體固定于固相載體(如聚苯乙烯微孔板)上。當加入含有相應(yīng)抗體或抗原的樣本時，樣本中的抗體或抗原會與固相載體上的抗原或抗體特異性結(jié)合，形成抗原 -抗體復(fù)合物。這種特異性結(jié)合是基于抗原和抗體之間的互補性，就像鑰匙和鎖一樣，只有特定的抗原和抗體才能相互匹配結(jié)合。
2.酶標記與底物反應(yīng)原理
-然后，加入帶有酶標記的抗體或酶標記的抗原。這些酶標記物會與之前形成的抗原 -抗體復(fù)合物中的相應(yīng)成分結(jié)合。例如，在雙抗體夾心法ELISA中，待測抗原先與固相抗體結(jié)合，再與酶標抗體結(jié)合。
-加入酶的底物。酶會催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生有色產(chǎn)物。例如，辣根過氧化物酶(HRP)常用的底物是鄰苯二胺(OPD)或四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。HRP可以催化底物氧化，生成有色的產(chǎn)物，顏色的深淺與樣本中抗原或抗體的含量成正比。
3.光學(xué)檢測原理
-酶聯(lián)免疫分析儀通過光學(xué)系統(tǒng)來檢測反應(yīng)產(chǎn)生的有色產(chǎn)物的吸光度。儀器中的光源(通常是鹵鎢燈)發(fā)出光線，經(jīng)過一系列光學(xué)元件(如濾光片、光柵等)后，變成特定波長的單色光照射到反應(yīng)孔上。反應(yīng)孔中的有色產(chǎn)物會吸收部分光線，未被吸收的光線則透過反應(yīng)孔被光電探測器(如光電管或光電二極管)接收。
-根據(jù)朗伯 -比爾定律，吸光度與溶液中有色物質(zhì)的濃度成正比。儀器通過測量吸光度，就可以間接計算出樣本中抗原或抗體的含量。
更新時間：2025-08-06 
瀏覽次數(shù)：33
我的位置：